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超声清创对糖足溃疡细胞增殖、皮肤修复和微生物负荷的作用

DFU的标准护理包括减压、感染治疗、改善循环、代谢管理、合并症治疗和局部溃疡治疗。

伤口清创是伤口床准备(WBP)的基本构成。规律的伤口清创有助于消除伤口床生物膜和清除利于生物膜形成的坏死组织。

虽然手术清创被认为是DFU治疗中的金标准,但并非总是可及、实际或适合每个患者。当考虑合并症、血管状况、感染水平、溃疡位置、和患者偏好等,我们可能会发现其他可替代方法更适宜。同时,手术清创有一些局限性,包括:不适用于血供不佳的清创;需要特定的手术技巧;需要专用的手术室;可能对伤口床造成大的损伤。

根据2018年在柏林召开的一场专家会议的意见,当手术清创无法开展或禁忌时,一种有效的替代方法是使用机械性清创策略,例如低频接触式超声清创(UAW)。UAW被证明是一种有效的清除失活组织和腐肉、以及生物膜的伤口清创方法,同时其不会损伤健康组织。有研究证实UAW可以导致更好的肉芽组织活力和增加慢性伤口的愈合率。

今天分享的研究是一项开放标签、随机对照研究,主要目的是评价UAW清创与手术/锐器清创相比,对复杂DFU细胞增殖和皮肤修复的作用;次要目标是评价UAW与手术清创相比,对微生物负荷的作用;第三个目标是评价和比较6周治疗后,UAW和手术清创对伤口状况、伤口大小、愈合时间和6个月随访后愈合率的效果。

本研究在西班牙马德里的Hospital Clinico San Carlos完成,共入组51名复杂DFU的门诊患者。所有患者由高年资医生先进行基础评估,包括单丝检查、多普勒ABI检测和足趾压力测定、以及经皮氧分压测定。受试者被随机分为两组,分别接受手术清创或UAW清创,每周一次,共6周。所有清创手术由同一外科医生完成。

手术清创需清除所有的坏死和失活组织、以及周围的胼胝。UAW清创使用德国泽立的SONOCA 185型号主机和专用清创手柄,工作频率25kHz。根据溃疡深度选择手柄类型。UAW组中大部分溃疡,使用40%输出强度治疗2分钟,而对于溃疡面积大于15cm2的,清创时间增加至3分钟。

在两次清创间期,伤口评估前用无菌生理盐水清洁伤口,所有患者接受标准DFU护理,包括湿性伤口敷料和正确减压,必要时,给予抗生素治疗感染。

主要测量参数:

1. 细胞增殖和皮肤修复:

对组织切片进行CD31免疫组化染色,光学显微镜下计数微血管/内皮细胞数量,结果表示为微血管密度。评分方法如下:0(无)、1(低,至少1个微血管)、2(中等)和3(超过2个微血管)(图1)

图1:CD31免疫组化染色(10X)从左至右依次为治疗0天时、治疗42天时的临床清创和愈合进展。本图为UAW清创组患者。

为了区别伤口组织中的胶原蛋白成分和其他成分如肌纤维和红细胞,使用Massons三色染色。胶原蛋白含量评分如下:0(无),1(少量),2(中等),3(大量)(图2)

图2:Masson’s三色染色(10倍放大),0天和42天时临床情况和愈合进展。本图为手术清创组的一个患者。

肌动蛋白染色用于评估伤口愈合中肌成纤维细胞的存在。这些细胞在愈合过程中的数量增加(图3)。

图3:肌动蛋白染色(10X),0天和42天时的临床情况和愈合进展,本图为手术组患者。

2. 微生物负荷

采集伤口组织标本,培养后进行定量和定性微生物学分析。结果用CFU/g表示。

3. 伤口状况评估

入院时和每周清创前后对DFUs进行评估。使用经过验证的伤口评分系统对肉芽组织状况进行评估。使用伤口评估三角对伤口渗液和周围皮肤情况进行评估。

结果

根据CD31染色、Masson三色染色和肌动蛋白染色,研究显示与手术清创相比,UAW清创可以显著改善复杂DFU的细胞增殖和皮肤修复(下图)。

本研究发现UAW组(log 4.27+/-0.3-Day 0 to log 2.11+/-0.8 CFU/g-Day 42)与手术组(log 4.66+/-1.21-Day 0 to 4.39+/-1.24 CFU/g-Day 42)相比,细菌负荷显著减少,p=0.01(下图)。

6周治疗后,两组的伤口状况均有所改善(Wollina评分),UAW组在伤口周围皮肤和渗液水平方面改善显著(见下表)。因此,本研究结果与专家共识一致,即UAW清创在清除细菌方面与手术清创一样有效,但其可以选择性清除失活/坏死组织和保护健康组织。

随访6个月后UAW组和手术清创组的愈合率类似。而在本研究中,UAW组溃疡的愈合时间要显著短于手术组溃疡,这可能与UAW清创有着更好的生物负荷控制和细胞增殖有关。

本研究是比较UAW清创与手术清创对DFU细胞增殖和皮肤修复作用的第一个随机对照研究,结果显示UAW不仅可以显著改善细胞增殖,其在清除失活组织方面与手术清创效果一致,但可以保护健康组织。UAW还可以显著降低伤口生物负荷。因此,当手术清创属于禁忌或无法开展时,UAW清创是一种有效的替代方法。同时,作者经验表明对于血供不佳DFU(神经缺血性)、服用抗凝药物、恶化的伤口创如有生物膜感染等情况,UAW亦适用于对DFU进行序列清创。

by Jose Luis Lazaro-Martinez
J. Clin. Med. 2020, 9(12), 4032

内容转载自@慢伤前沿公众号!

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